在休息一晚上是不会收超时费的。在服务区休息一晚上，只要保留休息时候的相关票据、凭证之类的，比如住宾馆的收费凭证，或者是在服务区购物的小票，出高速收费站的时候，由收费站的工作人员确认无误之后就可以免除超时费。

高速公路的超时费并不是为了不让车主在服务区休息或停留，主要是为了打击一些司机逃避过路费所制定的一种惩罚性的措施，为了避免一些不法分子在进入高速公路，通过换卡、弃卡等不同的方式长时间行驶，却交纳极少的交通费。

高速公路服务区是专门为乘客以及司机休息的场所，在这里有停车场、厕所、加油站，还有车辆的维修站点以及餐饮、超市等相关的设施。高速公路的服务区是高速公路产业的配套设施，对于高速公路的发展是有着重要的意义。